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992.
猪多杀性巴氏杆菌环介导等温扩增检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
为建立猪多杀性巴氏杆菌(Pm)的快速检测方法,本研究以Pm的PlpB基因序列为靶基因设计特异性引物,建立了Pm特异性的环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法.经反应条件优化,确定反应条件为63℃,20 min.检测结果显示,建立的LAMP检测方法具有良好的特异性,灵敏度为25 cfu/mL;与大肠杆菌、副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、沙门氏菌无任何交叉反应.采用建立的LAMP方法与常规PCR方法对临床54份分离样品进行检测,检测结果为31份为阳性,23份为阴性,二者符合率为100%.该方法的建立为Pm在临床上的快速检测提供了一种新的技术手段. 相似文献
993.
994.
995.
996.
热稳定脱脂米糠(HDRB)中蛋白质已严重变性,采用常规方法很难提取其中蛋白质。本研究其目的在于评价不同碳水化合物酶和蛋白质水解酶组合在HDRB蛋白质提取的作用,以及利用响应曲面方法优化蛋白质提取组合条件。结果发现使用果胶酶P-Ⅱ处理HDRB,继后对其残渣进行蛋白酶P处理,蛋白质提取率可达到80%。采用中心成分回归设计进一步对果胶酶P-Ⅱ、蛋白酶P、水糠比、温度、pH、提取时间进行RSM优化,最大蛋白质提取率可达到89%。本研究为合理利用米糠蛋白及利用米糠蛋白制备功能性短肽提供了可靠的方法。 相似文献
997.
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Sang Kyu Park Sangho Roh Jong-Im Park 《Journal of veterinary science (Suw?n-si, Korea)》2014,15(1):73-80
Various somatic cell nuclear transfer (SCNT) techniques for mammalian species have been developed to adjust species-specific procedures to oocyte-associated differences among species. Species-specific SCNT protocols may result in different expression levels of developmentally important genes that may affect embryonic development and pregnancy. In the present study, porcine oocytes were treated with demecolcine that facilitated enucleation with protruding genetic material. Enucleation and donor cell injection were performed either simultaneously with a single pipette (simplified one-step SCNT; SONT) or separately with different pipettes (conventional two-step SCNT; CTNT) as the control procedure. After blastocysts from both groups were cultured in vitro, the expression levels of developmentally important genes (OCT4, NANOG, EOMES, CDX2, GLUT-1, PolyA, and HSP70) were analyzed by real-time quantitative polymerase chain reaction. Both the developmental rate according to blastocyst stage as well as the expression levels CDX2, EOMES, and HSP70 were elevated with SONT compared to CTNT. The genes with elevated expression are known to influence trophectoderm formation and heat stress-induced arrest. These results showed that our SONT technique improved the development of SCNT porcine embryos, and increased the expression of genes that are important for placental formation and stress-induced arrest. 相似文献
999.
1000.
芽孢杆菌属细菌在芽孢状态下,对外界环境及理化因素具有高度抵抗力。适宜的温度、湿度及营养条件能促进芽孢萌发,影响其对常规灭菌方法的抵抗力。本试验选取蜡样芽孢杆菌作为研究对象,在适宜培养条件下使其形成芽孢,通过研究萌发后芽孢对温度、H2O2及含氯消毒剂等条件的抵抗力,证实了适当的条件(温度37 ℃、湿度40%、pH 7.4、30 min)能有效促进蜡样芽孢杆菌芽孢萌发,致使芽孢对高温(80 ℃、2 h)、H2O2(1.5 mol/L、2 h)及含氯消毒剂(有效氯含量约800 mg/L、2 h)等常规灭菌方法抵抗力明显降低,并能被有效杀灭和灭活,相对有效杀灭率分别达98.4%、98.9%及99.1%,有效杀灭率分别为88.3%、88.7%及88.9%,这对进一步研究芽孢杆菌属细菌的杀菌消毒条件具有重要参考意义。 相似文献